新冠疫苗保護(hù)性能評(píng)估
為了應(yīng)對(duì)新冠疫情威脅，目前已經(jīng)有很多國家開始了疫苗接種工作，但接種新冠疫苗后，產(chǎn)生的保護(hù)效果并不確定，評(píng)估新冠疫苗有效性的重要指標(biāo)之一就是接種者體內(nèi)中和抗體的含量。針對(duì)大規(guī)模疫苗接種后的人群，使用簡單、快速的膠體金免疫層析法，可快速評(píng)估每個(gè)接種者體內(nèi)的抗RBD抗體及中和抗體的水平。
采用膠體金免疫層析技術(shù)，通過雙抗原夾心法測試RBD結(jié)合抗體：取接種疫苗后的血清滴在試紙條加樣區(qū)，血清會(huì)在毛細(xì)作用下向前層析，結(jié)合墊上的膠體金會(huì)溶解，然后和血清一起向前移動(dòng)。血清到達(dá)檢測區(qū)后，膠體金標(biāo)記的S-RBD、血清中的抗體與檢測線上包被的S-RBD形成復(fù)合物，表現(xiàn)為檢測線顯色，血清中的抗體含量與檢測線顯色強(qiáng)度成正相關(guān)。反應(yīng)結(jié)束后，直接肉眼觀察顯色情況或采用膠體金檢測儀進(jìn)行測試。通過檢測線和質(zhì)控線上膠體金顯色強(qiáng)弱，可判斷RBD抗體的含量。該方法可檢測血清、血漿及其他分泌物中含有可與RBD相互作用的任何抗體，并且此方法不受樣本種屬及抗體型別的限制。
膠體金免疫層析檢測RBD結(jié)合抗體
應(yīng)用場景
血清中RBD抗體篩查、早期患者血清學(xué)診斷及疫苗臨床效果評(píng)價(jià)—抗RBD總抗體檢測。
測試結(jié)果
標(biāo)記: 膠體金標(biāo)記S-RBD (bs-46003P)和膠體金標(biāo)記兔IgG (bs-0295P)包被: C線為羊抗兔IgG (bs-0295G)，T線為S-RBD (bs-46003P/bs-46005P)
備注：“+++”表示反應(yīng)很強(qiáng)；“++”表示反應(yīng)較強(qiáng)；“+”表示反應(yīng)較弱；“±”反應(yīng)很弱；“-”表示無反應(yīng)。
采用膠體金免疫層析法的競爭法測試RBD中和抗體：取接種疫苗后的血清滴在試紙條加樣區(qū)，血清會(huì)在毛細(xì)作用下向前層析，結(jié)合墊上的膠體金會(huì)溶解，然后和血清一起向前移動(dòng)。血清到達(dá)檢測區(qū)后，膠體金標(biāo)記的S-RBD與檢測線上包被的ACE2結(jié)合，并被固定在檢測線上，表現(xiàn)為檢測線顯色，而血清中的中和抗體會(huì)與檢測線上的ACE2競爭結(jié)合S-RBD，從而導(dǎo)致固定在檢測線上的S-RBD減少，檢測線顯色下降。反應(yīng)結(jié)束后，直接肉眼觀察顯色情況或采用膠體金檢測儀進(jìn)行測試。通過檢測線和質(zhì)控線上膠體金顯色強(qiáng)弱，可判斷中和抗體抑制效果。該方法可檢測血清、血漿中可阻斷RBD-ACE2相互作用的任何抗體，并且此方法不受樣本種屬及抗體型別的限制。
膠體金免疫層析檢測RBD中和抗體
應(yīng)用場景
疫苗臨床效果評(píng)價(jià)、康復(fù)者血清中保護(hù)性抗體水平檢測—模擬病毒侵襲細(xì)胞過程，通過阻斷RBD與ACE2的結(jié)合間接評(píng)價(jià)機(jī)體內(nèi)抗RBD中和性抗體的水平。
測試結(jié)果
標(biāo)記: 膠體金標(biāo)記RBD (bs-46003P)和膠體金標(biāo)記兔IgG (bs-0295P)包被: C線為羊抗兔IgG (bs-0295G)，T線為Human ACE2 (bs-46001P/bs-46002P)
由此可見，陰性血清無中和活性，而陽性血清中含有中和性抗體，血清稀釋倍數(shù)在1:200時(shí)可完全阻斷RBD與ACE2的結(jié)合。
Bioss提供新冠抗體及中和性抗體檢測原料
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Recombinant Human ACE2 (His-Avi tag, HEK293) |
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Recombinant Human ACE2 (Fc-Avi tag,HEK293) |
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Recombinant SARS-CoV-2 Spike RBD (His-Avi,HEK293) |
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Recombinant SARS-CoV-2 Spike RBD (Fc-Avi,HEK293) |
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